描述:昆蟲蛻皮激素(Ecdysone)ELISA試劑盒操作簡單、結(jié)果準確,臻科生物從業(yè)多年一直專心致力于免疫學技術(shù)的積累與發(fā)展,以其優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品質(zhì)量與專業(yè)的技術(shù)服務(wù),贏得業(yè)內(nèi)廣大人士的認可。我司也一直和國內(nèi)外眾多高等院校與科研單位保持良好的合作關(guān)系,共同努力合作共贏。
一、中文名稱:昆蟲蛻皮激素(Ecdysone)ELISA試劑盒
規(guī)格: 48T /96T
品牌:臻科生物
種屬:昆蟲ELISA試劑盒
檢測波長:450 nm
所需樣本體積: 50ul
適用范圍:僅供科研,不得用于臨床診斷。
保存及有效期:2-8℃,六個月
檢測樣本種類:用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本的含量或者表達。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本。
臻科生物供應(yīng)的種屬有:昆蟲、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、昆蟲、豬牛羊、雞鴨鵝、植物ELISA試劑盒等。
二、實驗原理:
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中昆蟲蛻皮激素(Ecdysone)水平。用純化的昆蟲蛻皮激素(Ecdysone)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入蛻皮激素(Ecdysone),再與HRP 標記的蛻皮激素(Ecdysone)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的蛻皮激素(Ecdysone)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD 值),通過標準曲線計算樣品中昆蟲蛻皮激素(Ecdysone)濃度。
三、試劑盒組成:
1 | 30 倍濃縮洗滌液 | 20ml×1 瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶標試劑 | 6ml×1 瓶 | 8 | 標準品(240 pmol/L) | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶標包被板 | 12 孔×8 條 | 9 | 標準品稀釋液 | 1.5ml×1 瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 說明書 | 1 份 |
5 | 顯色劑A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 張 |
6 | 顯色劑 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 個 |
四、操作步驟:
準備試劑,樣品和標準品
加入準備好的樣品和標準品,37℃反應(yīng)30分鐘
洗板5次,加入酶標試劑,37℃反應(yīng)30分鐘
洗板5次,加入顯色A、B,37℃顯色10分鐘
加入終止液
15分鐘之內(nèi)讀OD值
后計算
五、試劑盒計算:
以標準物的濃度為橫坐標,OD 值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD 值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD 值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD 值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。
六、注意事項:
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5 分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD 值大于標準品孔di一孔的OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測定,計算時請后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
七.特別提醒:
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測含NaN3 的樣品,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。