牛ELISA試劑盒使用步驟是怎樣的: 1.即將進行試驗的版孔進行設定好,規(guī)范品5個點,每個點設定平行,需求用到10個孔,空白只需1個孔。剩下孔能夠做為樣本孔
2.稀釋規(guī)范,準備好5個EP管,然后在每個EP管中參加150微升規(guī)范稀釋液,編上編碼,分別為1,2,3,4,5,在1號管中參加150規(guī)范品,用槍頭重復吹打10次左右(留意操控起伏不要過大簡單發(fā)生氣泡)如果有渦旋儀能夠在渦旋儀上渦旋5秒左右,然后換槍頭,在1號管中取150微升參加到2號管,后面進程一次類推。終稀釋完,前面4個管中每管液體在150微升,5號管為300微升。濃度是從大到小。
3.規(guī)范、樣本、空白加樣:規(guī)范是每個濃度點2個孔(做平行),每孔參加50微升,加樣進程中留意換槍頭,樣本孔中每孔參加50微升,加樣進程中留意換槍頭,空白孔參加50微升蒸餾水。特別要闡明的是,規(guī)范加樣和樣本加樣盡量操控在15分鐘內(nèi)加完,如果時刻拖的太長,會導致前面孔先反響后面孔才開端反響,這樣數(shù)值誤差過大。加完樣后蓋上封板膜,至37攝氏度孵育30分鐘.
4.洗版,在孵育進程中能夠?qū)⑾礈煲号浜茫?0ml30倍濃縮洗滌液用蒸餾水或許去離子水定容到600ml即可。每孔參加250-300微升的洗滌液(不要漫過版孔),(如果有震動儀的話,能夠講板子放入震動儀上5秒左右,然后靜止三十秒,沒有請疏忽次進程)將板子在桌子上晃動5秒左右,然后靜置30秒,甩干,決定。闡明:甩干進程盡量要快,1秒內(nèi)就能夠完結(jié),不要漸漸歪斜倒掉液體,直接翻板甩掉液體即可。決定進程需求在桌子上墊一層吸水紙或許濾紙,版孔朝下拍幾下,拍干差異主要看吸水紙和濾紙上沒有顯著的水漬為完結(jié)。
5.每孔參加50微升的酶標試劑,此處在空白孔中不需求加(空白孔為空),孵育30分鐘。
6.洗版進程與4一樣。
7.顯色,先每孔中參加50微升的顯色A液,然后每孔中參加50微升顯色B液。避光37攝氏度顯色15分鐘
8.停止,每孔參加50微升的停止液,留意,加完停止液必須在15分鐘內(nèi)讀數(shù),超越時刻讀數(shù)無效。在規(guī)則時刻內(nèi)讀數(shù)都是有用的。